[摘 要：本文以高中生物酶切质粒连接实验为主来进行分析，在整体的分析过程中，需要坚持以酶切质粒连接为标准，通过生物的基础知识来拓展思路设计，把酶切和在连接的实验完善的更加合理，验证高中生物教学中关于酶切质粒后再连接的关键问题。在整体验证方法上，要以生物学科中的基础知识为主，以常见的多聚体和聚合物及其空间结构来实现粒连接的发展变化，通过实验和再实验来完善结构的最终意义，为学习和延伸实验知识调整奠定基础。
关键词：高中生物;酶切;连接;实验分析]
对于高中生物学习中，最主要的学习重点是以基因工程学为主也是比较难学一门，但是任何学科的学习都是建立在实验的基础之上，通过实验的结论来得出应用和分析，但是就目前来说，很多高中学校在生物学习中，过于固化，对操作实验的条件相对有限，对于生物酶切质粒连接实验上，需要以教学内容为主，通过相关理论和实验来完善该技术的需求，从中对学生在基因、专业知识点及其工作原理上的熟悉程度，为实验的学习和应用也展开了很大提升空间。
1质粒酶切、连接例题解析
1.1以案例为主来进行分析
在生物酶案例上，主要从实验学生物为主，来完善生物实验的基本方法，同时还要结合混合物的分离和提取为主，进行转换或者连接为主要内容，在生物酶切质粒连接实验上，主要以基因学为主展开教学，我们需要先对教学设计前进行合理的分析。首先，在前期的准备工作中，分析基因学中的转换和连接对于学生来说，学习难度不大，通过分析教学的基础知识，来对什么是基因转换，转换过程中需要结合限制酶属于单独还是联合，所需要的仪器是什么，及其在整个转化过程中需要注意的事项;其次，还要分析每个酶切质中碱基对的成分，最主要的是完全在操作上切割时，需要得到很长的DNA片段长度和每个酶切位点的位置，保证每个DNA分子成为环状分子，保证每个环节上不同的长度的线性，一旦发现各个电位出现误差，就要通过联合切割进行分子，使得DNA连接酶处理酶切产物，最终实现环形重组的现象，这一系的循环都是为后面的解析做铺垫。
1.2结合案例进行细节解析
由上述分析可知，需要以教学设计流程为主，来对生物酶设计流程进行研究和线索分析，还要结合转换和连接在对探讨生物酶切质的过程中，进行解析，在解析中需要结合每个酶切位点的切割情况来分析，一般这种会选择两个以上的切位点，保证不同的长度中线性不一样，每个段位上都会对各个切割的位置进行标记，同时每个DNA分子来进行切割上所产生的连接，也需要进行分割，产生一种比较长的DNA片段。在解析的结果中，发现基因学的知识不是只是从书本上去学习的，需要通过实验将酶切质的粒连接分析的更加彻底，在酶切除杂的顺序时，会以多种交流和分析及其总结，找到合适的匹配方案。
1.3结合实验来体现生物学习的价值
在上述操作上，教师需要带着学生去了解每个DNA的分组情况，提供足够的实验仪器，让学生自己去体会基因学的转化过程，对于高中生新课程改革来说，提出要充分发挥学生的主体作用，要让学生亲身参与实验探究的过程，通过具体实践达到提升学生素质的目的。在操作过程学生需要结合相关仪器和操作步骤来进行解析，在实验中，每个联合切割DNA分子是否会出现一种酶来发挥或者产生情况，同时还要选择各个片段进行两个连接，或者看是否有三片连接，实现多聚体的结构。
2限制性酶切与连接的实验
2.1结合生物实验来完善酶切质粒连接的思路
在进行验证限过程中，制酶切质连接主要通过酶切中DNA的颗粒和片段再进行催化连接，需要通过自我多片段进行重新连接，实现各种可能性。在制定实验设计前期，需要结合特定的大肠杆菌质粒来进行限制酶的切割，每次切割中，先对各个混合物进行综合，再用DNA连接酶进行再次连接，这两组需要以完整质粒进行对照电泳，把实验结构进行分析，并分析实验结果，把所得出的实验结构进行分析，保证各个酶切质中的思路按照正常程序进行。
2.2结合酶切质的实验来分析材料
在这个过程中会采用大肠杆菌质粒，每个切入点都是以个酶为单位还有一个三级切割位点为主，进行限制内切酶，同时还要保证DNA在进行连接过程中，实现酶的连接，保证DNA在实际操作上为实验的过程奠定基础。
2.3结合前期准备来完善实验过程
第一，先采用一支的离心管来进行对照，在分配比例上需要结合对照管来进行酶切反应，还要在每个管上进行标签进行，分别采取各个管进行反应，对于离心阶段上还需要结合温度，来控制好速度，选择一个合适的管对中质粒进行限制，避免在切酶过程中出现催化剪切的效果。第二，在每个离心管上，需要对每个标签进行标记，放置在指定的温度上进行合理的分析，保证中间的管内进行限制酶的失活。在最后的管内，需要放入适当的DNA进行活性连接酶缓冲混合液，并且合理的构建切割产物酶接反。
3总结實验结果并进行合理的分析
主要是通过多组凝胶电泳分析得出以下结论：对于实验中比较电泳大的一部分，结合片段集中进行采集，对于部分片段需要控制在指定的区域内，这样可以完整的保证质粒的空间构象结构，还以环状为主进行超螺旋结构。因此在这个过程中会发现超螺旋结构的优势，可以通过凝胶来控制酶切成的两段距离;其次，在进行连接酶的作用下，通过理论进行连接的过程中，对多聚体和片段进行现象分析，对于少许片段来说，需要通过表明在进行恢复连接，保证每个片段聚合多恢复原有大分子的趋势。然而这些实验结果都是建立在需要调整的状态下，保证实验结果是有教学依据的。从实验结果和分析上，来提高酶切质粒连接的实验标准，和依据。
4总结
综上所述，本文针对高中生物酶切质粒连接实验来进行分析，需要坚持以基础知识为依据，通过实验标准来保证验证结果，并结合实验来重点加强分析依据。
参考文献
[1]张玉林.基因工程中限制酶切割的几个问题[J].中学生物学，2012，4.
[2]朱旭芬.基因工程实验指导（第三版）[M].高等教育出版社，2016：33-36.
[3]朱旭芬.基因工程实验指导（第三版）[M].高等教育出版社，2016：30-33.