下面是小编为大家整理的预防医常用学实验技术原理与方法课程教学大纲（全文完整）,供大家参考。
预防医常用学实验技术原理与方法课程教学大纲 课程名称：预防医学常用实验技术原理与方法（The Experimental Technologies of Preventive Medicine : Principles and Methods）
课程编码：1322016217 课程类别：专业课 总学时数：20 课内实验时数：0 学
分：1 开课单位：公共卫生学院环境与职业卫生学教研室 适用专业：预防医学 适用对象：五年制本科 一、 课程的性质、 类型、 目的和任务 现代毒理学实验技术原理与方法是为适应预防医学专业学生掌握现代毒理学的知识需要而设置的一门专业选修课程。现代毒理学是一门与生命科学有着广泛联系和相互渗透的基础应用学科。现代毒理学研究方法和实验技术在药理学、营养与食品卫生学、环境卫生与劳动卫生学、临床医学、职业医学、法医学等领域有着极为广泛的应用。现代毒理学实验原理与方法旨在介绍现代毒理学常用实验技术的基本原理、操作方法、最新进展以及这些实验技术的具体应用。
通过本课程的学习，一方面为进一步学习劳动卫生学、环境卫生学、营养与食品卫生学等预防医学专业课程打下必要的毒理学基础；另一方面，为将来卫生防疫实际工作中毒理学知识的应用提供基本知识和技能。
二、本课程与其它课程的联系与分工 本课程宜从四年级第一学期开始，以确保学生学习本课程具有所需要的现代毒理学专业知识。
三、教学内容及教学基本要求 [1]表示“了解”；[2]表示“理解”或“熟悉”；[3]表示“掌握”； △表示自学内容；○表示略讲内容； 第一章 离体器官的灌流技术 离体肺灌流技术 仪器装备[3]；灌流液体[3]；通气气体[3]；操作步骤[3]；互理学应用举例[3]；注意事项 [2]； 第一节 离体心脏灌流技术[3]； 第二节 离体肝脏灌流技术[3]； 第三节 人胎盘灌流技术[2]； 重点：离体心脏灌流技术；离体肝脏灌流技术 难点：离体心脏灌流技术；离体肝脏灌流技术 教学手段：多媒体教学 教学方法：讨论教学法
第 二 章 细胞毒理学研究方法 第一节 细胞培养 培养细胞生物学[2]；细胞培养技术[3]；常用几种细胞的培养[3]； 第二节 培养细胞的生物特征与检测 培养细胞的常规检查[3]；细胞染色体分析[2]；培养细胞恶性转化[2]；大鼠气管上皮细胞转化试验[2]； 重点：细胞培养技术与培养细胞的常规检查； 难点：细胞培养技术 教学手段：多媒体教学 教学方法：讨论教学法 思考题：
1.细胞培养技术与注意事项？ 2.培养细胞的常规检查方法？ 第 三 章 细胞凋亡常用的研究方法 第一节 概述[1] 第二节 细胞凋亡的形态学评价 倒置显微镜和光学显微镜观察法[3]；荧光显微镜观察法[3]；透射电子显微镜观察[2]； 第四节 细胞凋亡时 DNA 的改变 DNA Ladder 测定[2]；大分子染色体 DNA 片段的测定[2]；凋亡细胞 DNA 含量的流式细胞仪分析[1]；DNA 片段原位标记[1]；调亡细胞断裂核小体 DNA 的免疫化学测定[1]；
重点：细胞凋亡的形态学观察 难点：细胞凋亡的形态学观察 教学手段：多媒体教学 教学方法：讨论教学法 思考题：
1、倒置显微镜、光学显微镜与荧光显微镜观察细胞凋亡的方法与注意事项？ 第 四 章 亚细胞组分的制备与功能检测 第一节 细胞膜的制备 红细胞膜的分离与鉴定[3]；肝细胞膜的分离与鉴定[3]；脑突触体膜的分离制备[2] 第二节 肾小管和小肠上皮细胞刷状缘膜的制备 肾小管上皮细胞刷状缘膜的分离与鉴定[2]；小肠上皮细胞刷状缘膜的分离与鉴定[2]； 第三节 线粒体的分离制备 脑线粒体的分离及鉴定[3]；心脏线粒体的分离制备[3]；肝脏线粒体的分离制备[3]；肾脏线粒体的分离制备[2]； 第四节 微粒体的制备及微粒体酶第的测定 微粒体的分离制备[3]；微粒体混合功能氧化酶系活性的测定[1] 第五节 溶酶体和过氧化物酶体的分离制备 原理[2 ]；仪器与试剂[2 ]；分离技术[2 ]；溶酶体纯度测定[1 ]； 重点：细胞膜的分离制备；线粒体的分离制备 难点：细胞膜的分离制备；线粒体的分离制备 教学手段：多媒体教学 教学方法：讨论教学法 思考题：
1、试述红细胞膜的分了与鉴定方法？
2、肝脏线粒体的分离制备方法？ 第 五 章 蛋白质（酶）的分离与纯化 第一节 蛋白质（酶）的粗分离 细胞破碎和蛋白质（酶）的溶剂提取方法[3]；盐析方法[3 ]；有机溶剂沉淀方法[3]； 第二节蛋白质（酶）的层析纯化 吸附层析方法[2 ]；离子交换层析方法[2 ]；凝胶过滤层析方法[2 ]；亲和层析方法[2 ]；金属螯合层析方法[2 ]。
第三节 电泳技术分离纯化蛋白质（酶）
醋酸纤维素电泳[3 ]；聚丙烯酰胺凝胶电泳[3]。
第四节 蛋白质受体功能测定 受体放射分析法[3 ]；基因重组检测系统[3 ]； 第五节 蛋白加合物测定 血红蛋白加合物的测定[2 ]；白蛋白加合物的测定[2 ]； 重点：蛋白质（酶）的粗分离；电泳技术分离纯化蛋白质（酶）；蛋白质受体功能测定 难点：蛋白质（酶）的粗分离；电泳技术分离纯化蛋白质（酶）；蛋白质受体功能测定 教学手段：多媒体教学 教学方法：讨论教学法 思考题：
1、细胞破碎和蛋白质（酶）的溶剂提取方法？ 2、蛋白质（酶）的盐析方法？ 3、蛋白质（酶）的有机溶剂沉淀方法？ 4、蛋白质（酶）聚丙烯酰胺凝胶电泳分离方法？ 5、蛋白质受体功能测定方法？ 第 六 章 分子毒理学基本技术 第一节 核酸的印迹杂交 核酸杂交的基本原理－核酸的变性和复性[3]；核酸杂交的重要工具－核酸探针[ 3]；常用的核酸分子杂交技术[3 ]； 第二节 蛋白质印迹杂交 蛋白质样品的制备[3]；SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳[3]；蛋白质的电转移[3]；蛋白质的杂交[3]； 第三节 聚合酶链式反应 参与 PCR 反应体系的因素及其作用[2 ]；PCR 反应温度和循环次数[3]；常用的几种 PCR反应[3]； 第四节 基因的序列测定 双脱氧链末端终止法[3 ]；化学裂解法[2]；
第五节 重组 DNA 技术 基因工程的重要工具－酶类[1]；基因工程的重要工具－载体[1]；获得的目的基因[1]；目的基因与载体的连接[1]；重组子导入受体菌[1]；重组子的筛选与鉴定[1]；重组体在宿主细胞中表达与调控[1]；表达产物－蛋白质的分离与纯化[1]； 第六节 单细胞凝胶电泳技术 检测机理[2 ]；实验程序及方法[2 ]；结果评价[2 ]； 第七节 荧光原位杂交（FISH）技术 基本原理[3 ]；FISH 技术的发展[2 ]；毒理学研究中应用的 FISH 技术[3 ]；FISH 技术中的注意事项[2 ]；
重点：核酸的印迹杂交；蛋白质印迹杂交；聚合酶链式反应；荧光原位杂交（FISH）技术在毒理学研究中应用； 难点：核酸的印迹杂交；蛋白质印迹杂交；聚合酶链式反应；荧光原位杂交（FISH）技术在毒理学研究中应用； 教学手段：多媒体教学 教学方法：讨论教学法 思考题：
1、核酸的印迹杂交方法？ 2、蛋白质印迹杂交方法？ 3、聚合酶链式反应步骤？ 4、荧光原位杂交（FISH）技术在毒理学研究中有哪些应用？ 第 七 章 基因芯片技术 第一节 基因芯片的原理和合成方法 基因芯片的原理[3]；基因芯片的离片合成法[2 ]；基因芯片的在片合成法[ 2]；基因芯片的结果检测与分析[3 ]； 第二节 基因芯片的分类 载体材料分类[3 ]；点样方式分类[ 3]；NDA 各类分类[3 ]；用途分类[3 ]；用途分类[2 ] 第三节 基因芯片的广泛应用[ 2] 重点：基因芯片的原理与结果分析； 难点：基因芯片的原理与结果分析； 教学手段：多媒体教学 教学方法：讨论教学法 思考题：
1、基因芯片的原理？ 2、基因芯结果的检测与分析？ 第 八 章 信号传递与细胞通讯 第一节 细胞间缝隙连接通讯的检测 划痕标记染料示踪技术[3]；显微注射染料示踪技术[3]；代谢合作检测法[3] 第二节细胞膜受体的分离与纯化 概述[2]；受体溶脱；受体纯化[2]； 第三节 第二信使系统[1] 重点：细胞间缝隙连接通讯的检测； 难点：细胞间缝隙连接通讯的检测 教学手段：多媒体教学 教学方法：讨论教学法 思考题：
1、细胞间缝隙连接通讯的检测及其方法有哪些？ 第 九 章 免疫毒理学方法 第一节 B 淋巴细胞功能检测方法 空斑形成细胞检测方法[3]；血清溶血素测定[3] 第二节 T 淋巴细胞功能检测方法 小鼠外周血 T 淋巴细胞酸性 α 醋酸萘酯酶（ANAE）染色法[3]；T 淋巴细胞亚群的检测[3]；T 淋巴细胞增殖功能测定[3]；迟发型超敏反应试验[2]； 第三节巨噬细胞功能测定
巨噬细胞非特异性吞噬功能测定[2]；巨噬细胞 Fc 受体功能检测[2]；肿瘤坏死因子（TNF）的测定[2]；一氧化氮生成的测定[2] 第四节中性粒细胞和 NK 细胞活性测定 中性粒细胞吞噬功能的测定[2]；NK 细胞活性的测定[2]； 第五节 细胞因子的测定 白细胞介素 1（IL-1）的检测[3]；白细胞介素 2（IL-2）的检测[3] 第六节过敏反应和自身免疫 皮肤致敏试验[2]；小鼠耳肿胀试验[2]；耳淋巴结试验[2]；窝淋巴结实验[2] 重点：淋巴细胞功能检测方法；细胞因子的测定 难点：淋巴细胞功能检测方法；细胞因子的测定 教学手段：多媒体教学 教学方法：讨论教学法 思考题：
1、 T、B 淋巴细胞功能检测的原理及方法？ 白细胞介素 1（IL-1）的检测方法？ 第十章 行为毒理学方法 及毒理学指标的统计与分析 第一节 动物行为评价方法 一般行为毒理学方法[3]；行为致畸学方法[3]；神经科学的发展与行为毒理学[2] 第二节人的行为功能评价方法 发展概况[2]；研究方法[2] 第三节 毒理学指标联合作用的统计方法 比值法[3]；效应图解法[3]；等概率和曲线法[3]；Logistic 图解法[3] 第四节 存活寿命表的统计指标 存活寿命表的统计指标[2]；计算步骤[2] 第五节 生殖发育试验的统计指标 试验动物与剂量[1]；生殖发育的统计指标[1]；数据处理和结果评价[1] 第六节 致突变试验的统计指标 概述[1]；实例[1] 第七节 致癌试验的数学模式示例 几项指标[1]；实例[1]； 第八节 行为毒理学[2] 第九节 毒理学相关学科的统计分析指标 数据类型[3]；体重与器官重量[3]；临床化学[3]；血液学[3]；组织病理学损害的发生率[3] 第八节 样品与染毒方式的统计问题 经食物和空气染毒分析[1]；悬浮颗粒物统计量[1] 第九节 毒理学良好实验室规范[2] 重点：一般行为毒理学方法与行为致畸学方法；毒理学指标联合作用的统计方法 难点：一般行为毒理学方法与行为致畸学方法；毒理学指标联合作用的统计方法 教学手段：多媒体教学 教学方法：讨论教学法 思考题：
1、 动物行为评价的一般行为方法和行为致畸方法有哪些？ 2、 毒理学指标联合作用的统计方法有哪些？
四 、学时分配表 章序 课程内容 理论学时 实验学时 上机学时 课外学时 习题学时 考核学时 小计 第一章 离体器官的灌流技术 2
2 第二章 细胞毒理学研究方法 2
2 第三章 细胞凋亡常用的研究方法 2
2 第四章 亚细胞组分的制备与功能检测 2
2 第五章 蛋白质（酶）的分离与纯化 2
2 第六章 分子毒理学基本技术 2
2 第七章 基因芯片技术 2
2 第八章 信号传递与细胞通讯 2
2 第九章 免疫毒理学方法 1
1 第十章 行为毒理学方法及毒理学指标的统计与分析 1
1
考试
2 2 合计
18
2 20 五 、课程考核方法及要求 1．考核方式：考查； 2．考核方法：笔试； 3．成绩评定：
总评成绩 100 分＝平时 40 分＋期末考试 60 分 平时成绩：考勤考纪：20 分 作业 20 分：每次作业占 2 分； 六 、选用教材及参考书（资料）
教材：
《现代毒理学实验技术原理与方法》（第 1 版）. 李龙、陈家堃主编. 化学工业出版社，2005 年版 参考书目：
1.《基础毒理学》（第 1 版）.江泉观主编.化学工业出版社，1994 年版 2.《毒理学》（第 1 版）. 刘毓谷主编. 中国协和医科大学联合出版社，1997 年版 3.《卫生毒理学》（第 1 版）.万伯健主编.辽宁科学技术出版社，1992 年版 4.《卫生毒理学原理和方法》（第 2 版）.李寿祺主编.四川大学出版社，2003 年版 5.《毒理学基础》（第 3 版）.周宗灿主编.北京医科大学出版社，2006 年版 6．《卫生毒理学实验教程》（第 1 版）.李百祥主编.黑龙江科学技术出版社，1997 年版 7.《毒理学基础》（第 4 版）.王心如主编.人民卫生出版社.2003 年版